[01199026]芒果苷联合顺铂对肝癌细胞HepG2的影响及其机理研究

1、课题来源与背景 本课题来源于桂财教[2010]13 号文件下达的2010年广西自然科学基金项目“芒果苷联合顺铂对肝癌细胞HepG2的影响及其机理研究”,任务书编号：2010GXNSFA013194。 2、研究目的与意义 原发性肝癌（Primary hepatic carcinoma,PHC）是一种常见实体恶性肿瘤。目前PHC的发病率和病死率呈显逐年升高的态势。顺铂对原发性肝癌疗效较好,但其毒性大,易产生抗药性,限制了其临床应用。因此,开展顺铂联合用药研究十分必要。为了解决这一问题,我们将芒果苷与顺铂联合,发现其对肝癌细胞HepG2的体外抑制作用明显高于单用芒果苷或顺铂。芒果苷（Mangiferin）是芒果叶的主要活性成分,是一种具有天然黄酮碳苷基本结构的化合物——四羟基吡酮。前期研究表明芒果苷很可能是新型蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosinekinase,PTK）抑制剂类抗癌新药,其与顺铂联合对肝癌细胞抑制作用明显增强。据此,我们拟对芒果苷联合顺铂抗肝癌作用及其机制进一步深入研究。采用现代细胞药理实验方法,研究芒果苷联合顺铂体外抗肝癌作用及其机制,为后期开发及临床应用打基础。 3、主要论点与论据 本项目研究包括两部分： （1）采用体外细胞实验的方法,将芒果苷与顺铂按不同配比加入 HepG2细胞培养板中共同孵育,直接观察癌细胞受抑制的程度,用 MTT 法检测细胞活性及芒果苷与顺铂量效关系及最佳配比,采用两药相互作用系数 （CDI） 评价两药相互作用性质;结果芒果苷与顺铂联用对细胞增殖及 PTK 活性抑制率的相互作用系数均在 0.3～0.7 之间,协同作用明显,二者最佳配比为芒果苷（10μg/ml）：顺铂（2.0μg/ml）为 5：1。 （2）用 ELISA 法测定癌细胞中蛋白酪氨酸激酶 PTK 活性,用 Western Blot 法检测 PTK 信号通路相关细胞因子;结果芒果苷对肝癌细胞 HepG2中 PTK 活性抑制率的影响明显;芒果苷及其与顺铂联合用药组可不同程度下调 HepG2中Bcr 一 Abl、p-JAK2 与p 一 STAT5 的表达。 4、创见与创新 芒果苷与顺铂联用对细胞增殖及 PTK 活性抑制率的相互作用系数均在 0.3～0.7 之间,协同作用明显,二者最佳配比为芒果苷（10μg/ml）：顺铂（2.0μg/ml）为 5：1。 5、社会经济效益,存在的问题 本项目的研究中发现,芒果苷不溶于水,体外细胞实验需要加入二甲基亚砜尚可溶解。在实际应用中也存在溶解与吸收差的问题。如何改善芒果苷的溶解性与生物通透性是今后芒果苷药理研究中需要首先解决的问题。本项目体外细胞实验研究发现,芒果苷与顺铂联用具有减毒增效的协调作用,今后拟从体内实验进行验证研究。