[01248708]背俞指针疗法对GERD大鼠内质网Ca2+-mTOR/Caspase-12介导ICC自噬与凋亡的影响

来源与背景：胃食管反流病（GERD）是由多种因素促成的上消化道动力障碍性疾病，其发病是抗反流机制下降和反流物对食管黏膜攻击作用的综合结果。

GERD在我国的发病率呈逐年上升趋势。其病程长、易缠绵反复，严重影响人们的生活质量，已经成为现代社会医疗的治疗热点之一。

迄今为止，对GERD发病原因及治疗方法取得不少进展，但其确切的发病机理尚不够深入，单纯应用西医药治疗GERD尚存在许多困惑。

虽然中医非药物疗法疗效确切，但其作用机理研究尚浅，故对本病中医病机探讨及非药物疗法的机理研究已成为亟待解决的关键问题。

近年来，我团队在临床运用背俞指针疗法治疗GERD虽然取得较为显著的疗效，但其治疗GERD的作用机理研究仍不够深入，因此，开展关于背俞指针疗法治疗GERD的作用机理研究迫在眉睫。

研究目的与意义：内质网的Ca2＋一方面调节食管平滑肌的收缩，另一方面，Ca2＋介导 CaMKK-AMPK-mTOR 自噬的通路，同时介导了calpain-Caspase-12 通路的 ICC 凋亡，两者之间通过凋亡相关蛋白 Bcl-2 与自噬特异性蛋白 Beclin1 的相互作用而交联，随着细胞的 ATP 水平变化而严密调控自噬与凋亡的平衡。

其中 AMPK 又是ATP的“敏感器”，受细胞内的ATP与ADP的浓度变化而激活。雷帕霉素受体（mTOR）是细胞自噬启动的敏感受体，掌舵着细胞自噬的方向盘。

背俞指针疗法作为GERD的有效治疗手段，取得了类似化学药物甚至超越化学药物的治疗作用，这种作用机理很可能与调控CaMKK-AMPK-mTOR/ calpain-Caspase-12通路，从而介导自噬和凋亡相关。

因而，本项目通过体外 ICC 培养，共聚焦显微镜检测 Ca2＋荧光变化，电镜观察 ICC 内质网自噬体、Western Blot 等方法检测自噬凋亡蛋白;并以背俞指针疗法干预 GERD 模型大鼠，观察内质网自噬体、检测自噬凋亡相关蛋白，探讨Ca2＋-CaMKKβ-mTOR/calpain-Caspase-12 通路介导内质网自噬而拮抗凋亡的效应，为揭示背俞指针疗法干预 GERD 的分子机制提供科学依据。

3.主要论点和论据：本课题组在十余年临床应用背俞指针疗法治疗大量 GERD 患者的临床实践及前期的科研认识，我们认为脾胃的气机升降失衡只是 GERD 的病机表象，而不是其病机之本质。脾胃的升降失衡根本原因主要为任督二脉经气不充，两脉经气升降交会失衡、运行失常。我们运用药穴指针疗法治疗 GERD 的总有效率为 97.5％，能明显提高食管下括约肌平均压力、改善食管炎程度、减少酸反流，从而改善反酸、反胃及烧心等症状。

经申请人前期 1 个国家自然科学基金项目之一“背俞指针疗法对胃食管反流病患者任督二脉穴位皮温与上消化道动力影响及相关性探讨（2011.01-2013.12，已结题）”，及市科技攻关项目“背俞指针疗法对GERD 患者穴位皮温与上消化道动力影响及相关性探讨（2010.01-2012.12，已结题）”等前期研究已初步证实：背俞指针疗法能够提高任督二脉的主要穴位皮温，特别是督脉皮温增高明显，提示任督二脉经气交会失衡能够得到改善，且与上消化道动力障碍的改善密切相关，初步验证了“任督二脉经气升降交会失衡是脾胃升降失衡致病的病机本质”的观点。

因此，我们推测，在 GERD 动力障碍的病理生理过程中，胃肠运动的起搏细胞ICC发挥着类似于调控脾胃升降枢机的枢纽的作用，其自噬于凋亡的平衡失调则于“阳脉之海”与“阴脉之海”（即任督二脉“经气升降交会失衡”相关），ICC在“ENS-ICC-SMC 系统”中是介于“ENS 系统”与“SMC 系统”中间的桥梁作用，而背俞指针疗法是基于对ICC 自身的程序性死亡（自噬与凋亡）的调控从而发挥治疗GERD的机制。

创见与创新：

（1）初步阐明了胃食管反流病是由内质网应激的Ca2＋介导CaMKKβ-AMPK-mTOR/calpain- Caspase-12 通路介导 ICC 细胞自噬而拮抗凋亡的病理生理机制，阐明 GERD 内质网自噬的分子机制之本质。

（2）初步揭示背俞指针疗法作用于食管 ICC内质网自噬的分子机制之本质，为该疗法治疗 GERD 提供客观依据。

社会经济效益及存在问题：

无。

历年获奖情况：

无。