[00125662]恶臭假单胞菌KT2440高效的基因敲除方法
交易价格：
面议
所属行业：
生物医药
类型：
发明专利
技术成熟度：
正在研发
专利所属地：中国
专利号：201010575202.2
交易方式：
技术转让
联系人：
南京师范大学
进入空间
所在地：江苏南京市
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
本发明涉及一种通过重组工程手段对恶臭假单胞菌KT2440高效的基因敲除方法。具体方法是首先通过重叠一延伸聚合酶链式反应的手段扩增而获得左右两侧分别为待敲除的靶基因上下游各为500个碱基对的同源基因，中间为卡那酶素抗性基因的DNA片段。再将此DNA片段电转化至以终浓度为2mM间甲基苯甲酸诱导重组酶表达的恶臭假单胞菌KT2440电转化感受态细胞中，通过重组酶介导的同源片段之间的同源重组，卡那酶素抗性基因取代了靶基因而直接获得了靶基因敲除的突变株。本发明所述的方法简单快捷，可成为在生物降解有机化合物等方面有着重要应用价值的环境微生物恶臭假单胞菌KT2440的遗传操作手段。
本发明涉及一种通过重组工程手段对恶臭假单胞菌KT2440高效的基因敲除方法。具体方法是首先通过重叠一延伸聚合酶链式反应的手段扩增而获得左右两侧分别为待敲除的靶基因上下游各为500个碱基对的同源基因，中间为卡那酶素抗性基因的DNA片段。再将此DNA片段电转化至以终浓度为2mM间甲基苯甲酸诱导重组酶表达的恶臭假单胞菌KT2440电转化感受态细胞中，通过重组酶介导的同源片段之间的同源重组，卡那酶素抗性基因取代了靶基因而直接获得了靶基因敲除的突变株。本发明所述的方法简单快捷，可成为在生物降解有机化合物等方面有着重要应用价值的环境微生物恶臭假单胞菌KT2440的遗传操作手段。
