[01303467]三七总皂苷对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8脑内氧化应激相关信号通路的影响研究

本研究项目为国家自然科学基金项目。随着现代社会人口结构老龄化的发展,阿尔茨海默病（AD,又称老年性痴呆）的发病率呈不断增加的趋势,已引起国内外学者的广泛关注。现代医学对老年性痴呆的发病机理研究认为,老年性痴呆是多因素引起的一种原发性大脑神经退行性病变,其特征表现为中枢胆碱能神经元的大量死亡及丢失,同时伴有神经炎斑和神经纤维缠结的形成,并含有β折片结构的淀粉样蛋白（β-AP）沉积,造成胆碱能神经细胞的损害和胆碱乙酰基转移酶水平下降和乙酰胆碱递质合成的降低,以及调节神经递质释放的递质囊泡膜蛋白突触素水平下降,从而影响递质释放,最终导致记忆减退和行为异常。传统中医理论则认为,气血是人体生命活动的物质基础,智力活动虽在于“元神之府”的脑髓,但离不开气血的滋养,伴随着机体的衰弱,不可避免的出现脏腑虚衰,导致气虚血瘀和气滞血瘀的后果是气血不能上达于脑,神明失养则智能减退,从整体观出发论证了老年性痴呆症的发病机理。中药三七具有散瘀止痛,消肿定痛功效。本研究以中医理论为依椐,用三七的主要有效成分三七总皂苷（PNS）治疗脑血栓及脑出血后期对病情康复有较好疗效,同时也发现对伴有老年性痴呆的患者,PNS对患者的记忆和行为异常有较好的改善作用。现代药理学的大量研究也表明,PNS具有抗炎、抗纤维化、抗脑动脉硬化、抗血栓形成作用;能拮抗Glu（谷氨酸）介导的兴奋毒性;能增强免疫力、清除自由基,抗衰老 ,增强学习与记忆作用。因此,无论从中医理论对老年性痴呆的辩证施治或从现代医学治疗老年性痴呆的观点出发,PNS所显示的药理作用应会对治疗老年性痴呆有效。 AD的发病机制非常复杂,除了β-AP与AD的发病有关外,氧化应激与AD的发生发展亦密切相关,氧化应激作为 AD的发病机制之一也越来越受到关注。前期结果研究显示PNS具有较强的抗自由基和抗氧化作用,然而,PNS通过影响氧化应激信号通路网络而对AD的作用机制仍然是不清楚的。在本课题,我们将以快速老化痴呆模型小鼠SAMP8为模型研究PNS对SAMP8大脑内氧化应激相关信号通路的影响。通过采用水迷宫检查PNS对快速老化痴呆模型小鼠SAMP8记忆与行为影响和采用SOD、GPx、CAT、GSH、PI3K、PKC、JAK、MAPK、JNK活性检测试剂盒分别检测PNS对SAMP8小鼠脑内氧化应激信号通路相关酶的影响;采用Elisa法检测小鼠脑内8-oxo-dG的含量;采用免疫组化、Western blot和定量PCR等方法检测PNS对SAMP8小鼠脑内SOD、GPx、CAT、GSH、UCP4、UCP5、PI3K、PKC、JAK、MAPK、JNK、Akt、PLCγ-1、Nrf2、ARE、STAT、p38、p53的蛋白含量及基因转录的影响,阐明PNS通过影响氧化应激信号通路而治疗AD的作用机理。本研究所采用的仪器设备先进,每项实验技术均建有成熟的SOP,适用性强,安全可靠,所检测结果可靠。本项目的研究结果提示 PNS 可增强SAMP8脑内抗氧化物酶 SOD、GSH-PX 和 CAT 的表达和活性,减少SAMP8 脑内 8-OHdG 的含量,其发挥抗氧化应激作用可能与其抑制 JAK2/STAT3 信号通路、激活 Nrf2/HO-1、PI3K/Akt、PLCγ1/PKC 和 Erk 信号通路有关。本项目阐明 PNS 影响氧化应激信号网络具体环节,进一步阐明 PNS 治疗 AD 的分子机制,为开发 PNS 防治 AD 提供更多的科学依椐。