[01312228]益气养阴清热法通过调节GLP-2分泌改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用机制研究

①课题来源与背景 2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）是由多种因素联合作用引起的一种代谢性疾病。根据2010年中国14省糖尿病（diabetes mellitus,DM）流调数据估算,全国糖尿病的患病率已达9.7%,现有糖尿病患者已达9240万,位居全球之首,而且糖耐量异常患病率高达 15%,成为T2DM的潜在成员,但是,由于T2DM的病理生理机制尚不完全清楚,也缺乏从根本上防治T2DM的手段,所以,进一步研究探讨T2DM的发病机制,早期干预糖尿病进程显得尤为必要。 ②研究目的与意义 在前期研究基础上,进一步分析KK小鼠T2DM进程中各阶段胰高血糖素样肽-2（glucagon- like peptide-2,GLP-2）分泌、肠粘膜上皮细胞间紧密连接蛋白、肠粘膜结构以及炎症因子水平的变化,探讨在T2DM慢性炎症进程中起关键作用的环节,进一步完善T2DM的炎症反应学说,同时探讨益气养阴清热方在糖耐量异常阶段干预炎症进程,抑制胰岛素抵抗的关键靶点,揭示肠道GLP-2分泌障碍是2型糖尿病慢性炎症学说中的重要环节。证实益气养阴清热方可以通过干预GLP-2分泌,进而干预炎症进程,防治T2DM进程。 ③主要论点与论据 论点：（1）在T2DM发生发展过程中,存在“肠道L细胞分泌GLP-2障碍,肠道粘膜屏障受损,最终启动炎症进程,参与胰岛素抵抗,进而导致DM”的病理生理过程。（2）益气养阴清热方可通过调节“肠道L细胞→GLP-2分泌→肠粘膜屏障”途径抑制慢性炎症反应,进而改善胰岛素抵抗,预防DM,分析益气养阴清热方干预炎症进程的关键靶点。论据：DM组小鼠肠黏膜超微结构遭到破坏,细胞连接打开,未找到L细胞,肠道GLP-2、ZO-1、Occludin表达明显降低,血清GLP-2水平明显降低,炎症因子水平明显升高,符合提出的病理生理过程,T2DM病程中的慢性炎症反应及GLP-2分泌障碍,可能与肠黏膜超微结构破坏,细胞连接被打开,肠黏膜上皮细胞通透性增加,细菌、毒素入血损伤L细胞有关。益气养阴清热方可以降低血糖,升高DM小鼠的血清GLP-2水平,降低血清炎症因子水平,使小鼠肠道的 GLP-2、ZO-1、Occludin 表达显著增加;益气养阴清热方各剂量组小鼠肠黏膜上皮微绒毛排列致密整齐、结构完整,细胞间连接紧密,并发现散在分布的L细胞及伯贝克颗粒,提示益气养阴清热方可能通过提高肠道 GLP-2 及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin 水平,改善肠黏膜超微结构,维持细胞间紧密连接,保护肠道 L细胞,使其正常分泌GLP-2,从而达到抑制慢性炎症反应、调节糖吸收稳态、改善胰岛素抵抗、降低血糖的目的。 ④创见与创新 （1）在既往中医研究基础上,提出脾胃损伤在“消渴”病变过程中起到关键作用,热毒也是“消渴”病变的重要环节。中医学中“脾”主运化水谷,主要负责食物的消化吸收,与现代医学胃肠功能相似,由此我们推断,胃肠功能紊乱在糖尿病的发病中起到重要作用。同时,中医理论中的“热毒”与现代医学中炎症机理相似,临床症状也具有极大的相似性,所以我们认为炎症在糖尿病的发病中也起到重要作用。将中西医理论充分结合,提出益气养阴,清热解毒的治疗大法,探讨益气养阴清热方通过改善GLP-2分泌,保护肠道粘膜,抑制炎症,进而干预胰岛素抵抗及T2DM的机制,探索中医药防治糖尿病的新思路及新方法。（2）结合前期基础,提出T2DM进程中存在“肠道菌群失调导致肠道粘膜损伤,肠道L细胞分泌GLP-2障碍,肠道粘膜屏障受损,导致细菌及毒素入血,启动炎症进程,参与胰岛素抵抗,进而导致糖尿病”的病理生理过程,而“GLP-2分泌障碍”可能是其进程中的关键环节,将进一步完善T2DM的炎症反应及肠粘膜损伤起源学说。 ⑤社会经济效益,存在的问题 益气养阴清热方可以改善胰岛素抵抗,降低血糖,对DM有确切的防治作用,可以作为防治糖尿病新选择之一,在临床上可以通过辨证应用于部分DM病人。课题有利于进一步扩展论证中医药在糖尿病防治中发挥的作用,丰富中医药现代化理论,培养了研究生科研意识及科研能力。目前存在的问题：项目目前只是对炎症因子及GLP-2相关进行初探,下一步项目组计划从基因组学及miRNA角度等进一步探讨其作用机制,对益气养阴清热方作用的具体机制进行深入研究。 ⑥历年获奖情况 作为分中心负责人参加的国家科技部973计划项目《金芪降糖片治未病（糖尿病前期）的循证研究》2015年获中国中西医结合学会科学技术三等奖。