[01343089]通关藤质量评价体系及其活性部位的研究与应用

1.课题来源与背景： 科技技术领域为医药。通关藤为萝藦科牛奶菜属通关藤Marsdenia tenacissima （Roxb）Wight et Arn的藤茎,具有散结止痛等功效,目前其单味药材的水提物制成的制剂是治疗消化道癌的必用药物之一,临床显效。但迄今为止,其抗肿瘤活性部位、机理尚不明确,质量评价体系尚不规范,临床用药混乱现象严重。为此,急待对其质量评价体系及活性部位进行系统研究。本成果获国家教育部博士后基金特别资助、省人事厅企业博士后基金、大连市科技局优秀人才基金资助。 2.技术原理指标及先进性、创造性： （1）通关藤质量评价体系的全面性、系统性填补空白—首次采用UV、IR光谱技术,首次从分子水平,采用RAPD技术,同时采用专属性的三指标活性成分通关藤苷A、D及其苷元,建立了包含光谱、色谱、分子生物学技术的定性和定量分析方法的质量评价体系,该体系全面性、系统性为国内首次。 （2）首次对通关藤及混淆品的生药学进行系统研究—首次对市场常见6种混淆品进行了生药学系统研究,分别采用性状、显微、UV与IR光谱技术、并从分子水平进行了混淆品的品种鉴定研究,并以此结果建立了包含二者真伪性状、组织构造、光谱、DNA分子生物学（RAPD）特征及相关照片、图谱的真伪品快速鉴别系统的共享评价体系,为国内首创,填补空白。 （3）活性部位总甾体皂苷系统研究：分离鉴定40余个化学成分,其中属中首次分离得到3个化合物,种中首次得到5个化合物,首次建立了总皂苷的质量标准,独创了采用大孔吸附树脂,纯度达60%以上的制备工艺,首次采用四种瘤株对7个单体成分进行了抗肿瘤活性研究,并探讨了抗肿瘤机理,确定了通关藤苷A、D、H及苷元等具有抗肿瘤活性,抗肿瘤机理与细胞凋亡相关,是通过诱导P53和P21mRNA、cyclinA和cyclinB1 mRNA的表达实现,与Bcl-2和Bax mRNA途径无关。 （4）活性部位总多糖系统研究：首次对总多糖进行了活性成分的研究,分离得到3个单体多糖,并首次对总多糖、3个单体多糖进行了抗肿瘤活性研究,确定四者具有抗肿瘤活性,独创了纤维素柱纯化,纯度达80%以上的制备工艺,首次建立了以3个活性多糖评价总多糖质量的方法。 （5）首次对总甾体皂苷及总多糖配伍的抗肿瘤作用进行研究：研究证实二者配伍使用后具有增效作用。 3.技术成熟程度及应用推广： 本成果已广泛应用于各药厂、检验部门、医院等。通关藤质量评价体系正在申请纳入2015《中国药典》,现有大连天宇制药、大连汉方药业作为企业内控标准的应用;通关藤与混淆品的系统评价平台,现有中国医药商贸东北分公司和国中医药辽宁普恩堂应用;总皂苷、总多糖的制备工艺、质量标准已分别被大连天宇制药、大连汉方药业应用。本成果获国家教育部博士后基金特别资助、省人事厅企业博士后基金、大连市科技局优秀人才基金资助;发表论文16篇,SCI收录2篇,CA收录10篇;正在申请专利3项;获省自然科学学术成果三等奖1项;完成博士后出站报告1部,硕士论文4部,博士论文1部;培养博士1人,博士后1人,硕士7人。