[01370719]丹参治疗肺炎的体外药效物质基础及其机制研究

一．课题来源与背景 炎症是机体的重要防御机制之一也是多种疾病发生发展的基本病理过程,在临床治疗中,抗炎药物是仅次于抗感染药物的第二大类药物,抗炎药物的研究一直以来都受到人们的广泛关注。此外,由于对炎症的发病机制尚未完全清楚,导致人们目前在药物选择上仍停留于改善病情及抑制免疫应答的水平,长期的药物治疗带来的不良反应,也给患者带来巨大的痛苦,寻求新的有效的抗炎药物,具有十分重大的意义。丹参被认为具有良好的抗炎作用,但是其药效作用物质基础尚不明确,且分子机制研究不够深入,限制了其在炎症治疗中的应用。基于此,课题组开展《丹参治疗肺炎的体外药效物质基础及其机制研究》,于2019年获得广西高校中青年教师科研基础能力提升项目资助。 二．研究目的与意义 社区获得性肺炎（Community Acquired Pneumonia, CAP）指终末气道、肺泡和肺间质的炎症。支原体和细菌性肺炎是最常见的肺炎,也是最常见的感染性疾病。近年来肺炎发病率有增长的趋势。呼吸系统疾病是导致我国人口死亡的主要原因之一,其主要死亡原因是慢性阻塞性肺疾病和肺炎。肺炎严重影响人类的生活质量和生命健康,因此加强治疗肺炎的相关研究,探索治疗肺炎的新方法,具有十分重要的意义。 丹参在肺炎的临床治疗上效果显著,但其作用物质基础及其分子机制不清楚,限制了其在肺炎治疗中的应用。项目采用体外药效学评价模型,明确丹参新化合物 4（ Diethyl Blechnic, DB）是丹参治疗肺炎的主要药效物质基础之一,阐明其治疗肺炎的作用特点和分子机制,为丹参在肺炎治疗中的临床应用提供科学理论依据和实验基础。 三．主要论点与论据 主要论点：对丹参新化合物 4（ Diethyl Blechnic, DB） 抗炎效果进行评价, 明确其具有良好抗炎作用, 且其作用机制通过 TLR4/MyD88- PI3K/AKT NF-κB 信号通路和氧化应激途径进行。 论据： 1) MTT 法检测结果如下, DB 在浓度为 5、 10、 20 μM 浓度下均无细胞毒性。 2)在 LPS 作用下, RAW264.7 细胞中 NO 的产生及释放均明显升高, DB 可显著抑制 LPS 诱导的 NO 的产生。 3)在 LPS 作用下, RAW264.7 细胞中 iNOS 和 COX-2 蛋白的表达明显上升, DB 则显著降低 LPS 诱导的 iNOS 和 COX-2 蛋白表达。 4) LPS 诱导 RAW264.7 细胞产生并释放炎症因子,在 DB 作用下,炎症因子 PGE2 的释放及 TNF-α、 IL-6、 IL-1β mRNA 水平均受到显著抑制。 5)在 LPS 作用下, RAW264.7 细胞内 MMP 下降,诱导 ROS 生成,使细胞产生炎性损伤, DB 处理后能有效恢复 MMP 并抑制 ROS 的产生,起到保护细胞的作用。 6)LPS 促进 NFκB 入核, DB 则明显减少 NF-κB/p65 进入细胞核从而影响 NF-κB 通路。 7) LPS 激活 TLR4 信号通路,促进该信号通路中各蛋白的表达及磷酸化水平, DB 能明显降低 TLR4/Myd88 蛋白表达,并有效抑制 TAK1、 PI3K、 AKT 蛋白的磷酸化水平。 8)在 RAW264.7 细胞中, LPS 诱导 Keap1 蛋白表达升高,产生氧化应激损伤,而 DB 作用下 Keap1 表达降低, HO-1、 NQO1 表达上升, NRF2表达升高且促进入核,则 DB 能抑制 LPS 诱导的氧化应激损伤,从而发挥抗炎作用。 四．创见与创新 （1）研究特色：基于丹参治疗肺炎的中医药理论指导,以及丹参在临床上的应用,结合本项目的前期研究基础,对丹参体外抗肺炎作用及TLR4/MyD88- PI3K/AKT NF-κB 信号通路和氧化应激途径进行探索,从分子水平揭示总丹参酮治疗肺炎的作用机制,具有一定的特色及新颖性。 （2）创新成果：通过对本项目的系统研究,阐明丹参治疗肺炎的物质基础与作用机制,为扩大其在治疗肺炎临床应用提供科学依据和扎实实验基础。 五．社会经济效益 自改革开放后,随着人们生活水平的提高和对自身健康的重视程度不断提升, 以及医疗卫生支出的逐年提高,我国肺炎用药行业一直保持快速增长势头。特别是最近五年,肺炎用药行业的企业数量不断增加,截止 2019 年,我国肺炎用药行业生产企业约 500 多家。 肺炎用药行业整体市场规模呈现快速增长势头,从2015 年的 38 亿元增至 2019 年的 48 亿元。特别是 2020 年新冠肺炎疫情的爆发,极大促进了肺炎用药市场规模的快速增长。 随着全球经济的快速发展以及人民生活水平的逐渐提高,中医药行业的健康、良性发展越来越被重视。在现代环保观念影响下,人们越来越追求少污 染、少副作用的纯天然药物,严格的生产要求及质量给天然民族药物带来了商机。 自“十三五”以来,国家主管部门以及各地方政府陆续出台了支持中药肺炎用药发展的政策和规划。本课题研究对象丹参是一味已广泛应用于临床研究的药物,用途广,疗效卓,性平无毒,药源广而价廉易得,是一味值得认真研究和推广的药物,对其天然成分的研究与开发具有广阔的应用前景。 六．历年获奖情况 无。 七．成果简介要向社会公开 丹参新化合物 4（ Diethyl Blechnic, DB）具有良好抗炎作用,其作用机制通过 TLR4/MyD88- PI3K/AKT NF-κB 信号通路和氧化应激途径进行。