[01376084]遗传性异常纤维蛋白原血症致病基因鉴定及其致病机制的研究

①课题来源与背景 本项目来源于国家自然科学基金项目“遗传性异常纤维蛋白原血症致病基因鉴定及其致病机制的研究”（项目编号：81560342）。遗传性异常纤维蛋白原血症（Congenital dysfibrinogenemia, CD）是一种纤维蛋白原（Fg）基因缺陷导致Fg结构异常与功能缺陷的遗传性疾病。CD患者临床表现呈多样性：无症状、出血、血栓形成或既有出血倾向又有血栓形成;而患病孕妇可有自发性流产、胎盘早剥等异常表现。CD易被误诊为低纤维蛋白原血症、易栓症等出血或血栓性疾病,或易被漏诊。编码基因的碱基替换或者缺失等突变导致纤维蛋白原分子结构异常与功能缺陷,是CD分子致病机制。CD临床表现与纤维蛋白原基因突变有较密切的关系。因此,为减少CD患者的误诊或漏诊,以及有效防范其发生出血或血栓的风险,需要探索我们地区CD患者的Fg缺陷类型与基因突变谱,以及建立CD诊断方案（国内外尚无统一的CD诊断标准或方案）,这将有利于CD诊断、治疗及产前优生检查。 ②技术原理及性能指标 1.通过收集73例CD患者与81例健康正常人的血浆,分别用Clauss法与PT换算法检测两组纤维蛋白原浓度。与正常对照血浆比较,CD患者血浆的Clauss法测定结果显著降低,纤维蛋白原 PT演算法/Clauss法的比值显著升高,通过比值诊断CD的ROC曲线分析发现,当比值＞1.43时,其诊断CD的灵敏度及特异度均为100%,该比值能快速准确的实验诊断CD,极大减少临床CD患者的误诊或漏诊。 2.项目组对263例CD患者进行基因检测分析,发现患者的突变位点主要集中在FGA基因Arg16和FGG基因Arg275。另外,发现了两个新的突变位点,分别是FGA基因Gly13Arg与FGG基因Ala327Val杂合突变位点,以及一个新的FGG基因Cys165Arg杂合突变的遗传性低纤维蛋白原血症位点,均为国际首次报道。 3.大部分CD患者均有纤维蛋白原聚集功能及凝固率降低等蛋白功能受损表现,有血栓倾向的患者其纤维蛋白原溶解率下降;血栓弹力图可完整的检测CD患者的凝血功能,通过检测发现,与正常对照比较,CD患者K值明显延长、Angle值明显减低,反映了患者的纤维蛋白原功能活性降低,以及纤维蛋白块形成及相互聚集的速度减慢。 4.需要外科、妇产科手术的CD患者,应该结合临床表现与家族史,进行个体化治疗;对于无症状的CD患者,其围手术期不需要输血浆或血制品。 5. CD的诊断方案：（1）临床表现：大部分患者无任何症状,少部分患者有轻度出血和/或血栓形成。（2）凝血功能检查：患者Fg为PT演算法正常或增高、Clauss法明显降低, Fg抗原/活性比值（PT演算法结果/Clauss法结果）＞1.43,或Fg-Clauss法结果/PT演算法结果＜0.7;凝血酶时间（TT）延长;凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血酶原时间（APTT）通常无异常。（3）家系调查：绝大多数患者为常染色体显性遗传,患者和父母一方或其他家系成员具有相同的凝血功能检查结果和临床表现。（4）基因检测：对于可疑患者,或者为了明确患者基因突变与出血、血栓形成临床表现的相关性,需要进行Fg的缺陷基因检测。 ③技术的创造性与先进性 1.从基因、蛋白及功能等方面,深入探索CD的致病机制,率先建立了基于本地区CD患者纤维蛋白原基因突变谱,在国际上首次报道FGA基因Gly13Arg、FGG基因Ala327Val、FGG基因Cys165Arg等杂合突变位点,丰富了我国纤维蛋白原疾病的遗传学数据。 2.在国际上率先提出CD的诊断方案。 ④技术的成熟程度,适用范围和安全性 本成果技术成熟,CD诊断方案能够帮助临床医生精确诊断CD患者,减少漏诊与误诊。需要外科、妇产科手术的CD患者,应该结合临床表现与家族史,进行个体化治疗;对于无症状的CD患者,其围手术期不需要输血浆或血制品。 本成果在以下领域有很大应用前景：1、临床医学,2、输血学, 3、血液疾病, 4、遗传性疾病。 ⑤应用情况及存在的问题 该成果已应用于CD的诊断、鉴别诊断、治疗及产前优生检查等。