[01631639]轻微型肝性脑病认知功能障碍特异性代谢物谱分析及大黄煎剂干预作用研究

轻微型肝性脑病（Minimal hepatic encephalopathy,MHE）是肝性脑病的一个特殊类型,该病通常没有典型的肝性脑病的表现,但采用精细的神经生理和心理检查方法可检测出异常结果。MHE如不能及时处理则会进展为临床型肝性脑病,从而增加患者的死亡率。因此,早期诊断及治疗MHE具有重要的临床意义。 轻微型肝性脑病的核心病因病机为“痰、瘀、毒”互结,致腑气不通,脑窍蒙蔽。本研究以通腑开窍为法,采用大黄煎剂保留灌肠治疗MHE,本方由大黄30g,乌梅30g组成,方中大黄为君药,具有泻下攻积,清热泻火,凉血解毒,活血祛瘀之功;乌梅为臣药,具有敛肺,涩肠,生津的功效,两药合用可将肠道毒浊之气排除体外,以达开窍醒神之效。基于前期国家自然科学基金等课题的研究发现,采用大黄煎剂保留灌肠治疗肝性脑病（Hepatic encephalopathy,HE）疗效肯定,其抗HE效应通过抑制肠道内细菌的生长、降低肠道pH值、阻止肠道NH3的吸收及保护肝细胞线粒体结构和功能等途径实现。本项目应用代谢组学、神经心理学等多学科技术与方法,探讨MHE认知功能障碍特异性代谢物谱及大黄煎剂的干预作用。 本研究采用了GC-TOFMS和UPLC-QTOFMS代谢组学分析平台来分析健康人群及MHE患者的血清代谢物谱,发现健康人群与MHE血清中代谢物组之间存在差异,这些差异代谢物质可能是MHE的特异性生物标志物,这些差异代谢物质有助于MHE发病机制的研究;根据所得数据建立的OPLS-DA模型可用于预测及诊断MHE。 本项目完成了以下技术经济指标： （1）与健康人群组相比,在MHE组血清中找到60个差异性代谢物,包括牛磺酸、缬氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等。这些代谢物可能为MHE患者的特异性生物标志物,这些标志物有助于MHE的早期诊断。 （2）与肝硬化患者相比,MHE患者血清中甘氨鹅脱氧胆酸、猪胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸等比其在肝硬化患者血清中高出约2倍左右,而缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、神经鞘氨醇水平均低于肝硬化患者,表明胆汁酸成分的改变,可以使细菌生存的环境发生变化,导致肠道菌群失衡,而肠道菌群失调又反作用于胆汁酸,进一步加重其代谢紊乱,从而影响脂质代谢并加重肝脏细胞毒作用。 （3）在MHE患者血清中,缬氨酸、别异亮氨酸和异亮氨酸水平降低,而苯丙氨酸及酪氨酸水平升高,佐证了MHE的“血浆氨基酸失衡学说”;鞘氨醇的含量降低,提示MHE患者神经细胞的正常生长、分化、凋亡过程受到影响,这可能是导致MHE患者认知功能障碍的原因之一;4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸（Docosahexaenoic acid,DHA）水平降低,这可能与MHE 患者出现的记忆力、反应速度等的下降有关;血清甲状腺素水平降低,提示MHE患者存在一定程度的糖、脂肪和蛋白质的代谢障碍;维生素E水平降低,提示肝功能受损。 （4）大黄煎剂对MHE患者在降血氨,改善NCT-A、DST、WHO QOL-BREF评分、认知功能以及肝功能方面具有明显疗效。 （5）公开发表相关学术论文12篇。 （6）共培养硕士研究生9名、博士研究生2名,充实了研究队伍,提高了科学研究水平及临床研究操作技能,掌握了相关临床研究方法,积累了相关研究经验。 本项目的完成将GC-TOFMS和UPLC-QTOFMS代谢组学分析技术应用于MHE患者血清特异性代谢物谱分析,为临床诊断MHE提供了新的思路,揭示了MHE认知功能障碍可能的发病机制,探索了MHE早期诊断方法;研究表明,大黄煎剂对MHE患者具有降血氨,改善肝功能以及认知功能的作用。