[01712701]直立百部愈伤组织高效诱导成苗的方法

1.课题来源与背景：直立百部(Stemona sessilifolia(Miq.)Miq.)为百部科百部属植物，产浙江、江苏、安徽、江西、山东、河南等省。直立百部块根是《中国药典》(2015年版)收载中药百部的三种法定来源之一，具润肺下气止咳，杀虫灭虱的功效。一直以来，直立百部都依靠挖取野生品作药用，由于只挖不种，加上生长较慢，其野生资源日趋枯竭。同时，由于直立百部分布范围有限，市场上几乎难以找到直立百部商品药材，故直立百部人工种植和抚育势在必行。虽有关于直立百部组织培养(专利申请号201410540445.9公开日2014年12月24日)和同科同属植物蔓生百部(李克烈，蔓生百部组织培养快繁技术，广西农业科学，2005，36：505-506)及对叶百部(杨振德，对叶百部组织培养快繁技术研究，现代农业科技，2016，2：105-107，115)组织培养的相关报道，但是尚未有直立百部愈伤组织诱导成苗的文献报道。 2.技术原理及性能指标：(1)对直立百部进行愈伤组织培养，快速获得丛生芽，在短时间内培育出大量适合移栽的直立百部种苗，显著提高了直立百部种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足市场上的需求。(2)在MS分化培养基中添加的玉米素和激动素属于常见植物生长调节剂，便宜易得，可大大降低直立百部组织培养中的成本消耗，达到降低成本的目的。(3)在MS壮苗培养基中添加6-苄氨基嘌呤和萘乙酸可促进芽长高展叶。(4)该发明可重复性操作，方法简单易行。(5)该发明为后续直立百部的转基因研究打下了基础。 3.技术的创造性与先进性：该发明公开了一种直立百部愈伤组织高效诱导成苗的方法，以直立百部嫩芽作外植体，置于MS初代诱导培养基中进行诱导得到无菌试管苗，将试管苗置于MS愈伤诱导培养基中进行愈伤组织培养，所得愈伤组织置于MS分化培养基中得到大量丛芽，将丛芽置于MS壮苗培养基中进行壮苗培养，得到的健壮植株置于MS生根培养基进行生根培养。 4.技术的成熟程度，适用范围和安全性：试验表明，采用该发明的繁殖方法得到的丛生芽增殖系数为40～80倍，获得组培苗生根率在95％以上，移栽苗床成活率在90％以上。因此，该发明可有效利用现有资源快速繁殖直立百部，解决了直立百部工厂化生根育苗的问题，并能充分保障其医药用途开发所需原料来源。 5.应用情况及存在的问题：还没有大规模应用。