[01814293]活血软坚方对兔颈脊髓慢性受压纤维化GFAPmRNA表达的影响

通过建立兔脊髓慢性受压动物模型,运用分子生物学、脊髓微血管造影、免疫组化、电镜等技术和方法观察颈脊髓慢性受压后星形胶质细胞的形态、胶原纤维酸性蛋白mRNA、神经丝蛋白表达、脊髓组织超微结构等反映脊髓纤维化及神经元微环境改变的指标,应用活血软坚方治疗观察对受压脊髓血循环、脊髓纤维化、神经元微环境的影响,结果显示能改善血循环、抗纤维化、改善神经元微环境的影响。 1.慢性受压兔脊髓组织中的TXB2/PGT2、VEGP的含量,脊髓组织微血管造影。 脊髓慢性受压后,脊髓组织的TXA2/PGT2调节失调,脊髓微血管显影减少、分布短小、血循环障碍。活血软坚方组、中药活血方组能调节TXA2/PGT2,促进VEGP表达,脊髓组织微血管显影面积增大,有促进血管修复、改善血循环的作用,并能改善神经元微环境。 2.兔脊髓组织中的胶原纤维酸性蛋白mRNA的表达。 研究发现脊髓慢性受压后,空白正常组GFPA阳性细胞和mRNA表达较低,但对照组有较强的表达,表明损伤后星状胶质细胞增生,胶质瘢痕增多。中药活血软坚方治疗组GFAP表达少于对照组,其有抑制星形胶质细胞增生和GFPA表达,减少瘢痕形成的作用。 3.尼氏体染色法观察脊髓细胞和星形胶质细胞的改变。 观察到兔颈脊髓慢性受压后出现脊髓灰质神经元萎缩、脱失,白质广泛髓鞘改变,受压严重出现明显纤维化改变。活血软坚方组、中药活血方组的神经元计数均比造模对照组多,差别有统计学意义。（P＜0.05） 4.采用免疫组化法观察神经元神经蛋白的变化。 采用透射电镜方法观察神经细胞的超微结构变化。中药活血软坚方组神经丝染色显示较造模对照组好,提示中药有促进神经元NF表达,改善神经元微环境,恢复细胞间联系的作用。电镜观察造模对照组见神经元细胞核缩小,核膜“裂隙”样改变,胞核颗粒样改变,核仁不清,粗面内质网脱粒并减少,线粒体少见,细胞器裂解形成空洞,髓鞘板层大面积解离,有的断裂、板层结构散乱,形成空泡结构,轴浆内各种细胞器崩解。中药活血软坚方治疗组见神经元体积稍变小,大部分神经元形态基本正常,但有部分出现核膜不清,粗面内质网发生脱粒现象,线粒体肿胀,髓鞘发生脱髓鞘改变,髓鞘板层结构紊乱。轴突结构基本正常,可见微管、微丝及线粒体等细胞器,部分见有细胞器聚集。 中药活血软坚方通过改善受压脊髓血供、脊髓微血管,抗脊髓纤维化,改善神经元微环境,对神经损伤具有保护作用,并可通过调节神经元的可塑性促进损伤功能的修复,对治疗早期轻型脊髓型颈椎病具有一定意义。