[01829034]基于CD14/TLR-4-NF-κB通路探讨清热化湿类方药干预幽门螺杆菌感染胃癌的研究

中国是胃癌世界高发区之一,中国人群Hp感染率在60%以上,而Hp作为Ⅰ类致癌因子在胃癌的发生、发展中占据重要地位,因此开展Hp感染相关胃癌防治研究已成为当前我们面临的重要课题之一。有研究证实Hp感染后的CD14启动子区的多态性与胃癌的易感性密切相关,可以增加胃癌发生的风险。课题组由此提出工作假说,CD14单核苷酸多态性在Hp感染相关胃癌中占据重要地位,CD14与TLR4结合后形成具备高亲和力结合和信号转导功能的受体复合体,将信号转导到细胞内,激活NF-κB这一信号通路,这一生物学过程被认为在Hp感染相关胃癌发生、发展中具有关键作用。本项目经过三年研究,初步确定了CD14与胃癌相关性,筛选出CD14基因与人相关性的新突变位点;成功的构建了稳定沉默表达CD14蛋白胃癌SGC-7901细胞株;完成了CD14蛋白对NF-κB活性及其下游细胞因子中相关指标检测。此阶段主要是探讨观察人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡及CD14 表达变化,探讨清热化湿类方防治人胃癌的可能机制。 本项目从在体和离体实验两个层面,拟通过在体建立HP联合MNU胃癌小鼠模型,比较低、中、高剂量清热化湿组和对照组（标准三联疗法）对小鼠胃组织形态学及其超微结构的影响,应用现代分子生物学技术分析CD14/TLR-4-NF-κB通路中相关指标表达。离体培养制备清热化湿方含药血清,检测其有效组分,体外培养人胃癌 SGC-7901 细胞,构建沉默及过表达CD14-SGC7901 细胞系,以不同浓度清热化湿方含药血清分别干预 SGC7901 细胞,应用透射电镜及流式细胞仪检测细胞凋亡、周期、增殖,应用现代分子生物学技术检测该通路中相关指标表达。研究结果将有望为中医药治疗胃癌提供新的思路,必将造福于Hp感染相关胃癌患者,产生良好的社会效益与经济效益。 清热化湿类方药已在区内外多家医院（广西中医药大学第一附属医院、广西中医药大学附属瑞康医院、广东江门市五邑中医院、海南省三亚市中医院、平南县人民医院、桂平市中医院、北海市中医院、浙江省中西医结合医院、南宁市中医医院）应用,在防治hp感染相关慢性胃炎取得满意疗效。相关成果已在国内中文核心期刊发表论文7篇,培养硕士3名。