本发明基于人血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)的蛋白晶体结构,设计并开发与其特异性结合的多肽,公开其筛选方法、鉴定和用途,所述多肽的氨基酸序列通式为CXXPFXP,X为20种天然氨基酸中的任一种L型或其D型氨基酸。本发明还涉及该多肽的酰胺、酯或其盐,或该多肽形成的活性片段、活性衍生物及融合型多肽、或以该多肽为配体形成的聚合物。利用计算机模拟筛选、免疫荧光法体外验证,获得VEGFR-3高表达的肿瘤靶向多肽,方便快捷,所筛选的多肽结构清楚,与靶蛋白亲和力高,几乎没有免疫原性,容易制备和生产,在肿瘤靶向给药、成像和诊断及基因转染领域具有较广泛的应用前景。