[00292353]CRISPR/Cas9特异性敲除乙型肝炎病毒的方法以及用于特异性靶向HBVDNA的gRNA
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技术详细介绍
本发明涉及分子生物学与生物医药技术领域，具体的说，本发明涉及基于CRISPR系统的gRNA序列及其组合在乙型肝炎病毒治疗中的应用。本发明根据CRISPR?gRNA的设计原则以及不同基因型HBV序列的保守性区域，设计了8种指导RNA（gRNA），并且将其构建在PX330表达载体上。在细胞模型和小鼠模型中利用这8条gRNA，及其组合指导的CRISPR/Cas9系统，可以有效的抑制乙型肝炎病毒基因的表达和复制。多条gRNA联合使用可以得到更好的效果，且可以更好地抑制不同基因型的HBV复制。这一系统有易于操作，对HBV复制的抑制效率高，对于多种基因型适用的特点。因此，本发明涉及的gRNA及其组合有望在制备治疗乙型肝炎病毒新型药物中得到应用。