技术详细介绍
摘要：本发明公开了一种双基因共表达重组载体，在初始载体中携带有基因表达框序列syn，所述基因表达框序列syn含有：终止子—多克隆位点—双向启动子序列PCarB—TA克隆制备序列—终止子，所述基因表达框序列syn的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:1所示；在所述初始载体中还携带有潮霉素抗性基因hygR，所述潮霉素抗性基因hygR的核苷酸序列如SEQ.ID.NO:2；具体构建了一个双基因共表达重组载体pPMPT，为在初始载体pATZ中含有基因表达框序列syn和潮霉素抗性基因hygR，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO:3所示，同时还公开了该载体的构建方法以及在丝状真菌三孢布拉霉中的应用。本发明提供的重组载体可在一个质粒上同时添加两个基因，而且通过农杆菌介导可以整合到丝状真菌基因组中，以单拷贝插入，实现双基因共表达，其遗传稳定。