技术详细介绍
摘要：本发明公开了一种具有生产和回收纤维素内切酶双重功能的酵母菌株的构建，属于酶工程领域。通过把酿酒酵母TDH3启动子序列、酿酒酵母分泌信号肽编码序列、烟曲霉纤维素内切酶编码序列、酿酒酵母凝聚因子C端的400个氨基酸片段编码序列、酿酒酵母TDH3终止子序列按顺序合成，在两端加上限制性内切酶位点，通过酶切构建到pPIC9K质粒中，再将该质粒转化到酵母中得到具有生产和回收纤维素内切酶双重功能的酵母菌株。其生产纤维素内切酶的回收率达到86%，发酵后内切酶的酶活达到8.5U/g湿酵母。本发明实现了纤维素内切酶生产和同步浓缩回收的一步完成，降低了能源消耗，降低了成本，具有较强的实用性。