技术详细介绍
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种新型表达Cry3A杀虫蛋白的植物内生工程菌及其构建方法与应用。该工程菌的DNA序列如序列表SEQ ID NO1所示。本发明选用了针对鞘翅目害虫的Cry3A杀虫蛋白，运用T7超表达系统，通过对Cry3A密码子的优化、表达载体的筛选、插入位置的分析、诱导条件浓度等的组合优化，实现了重组工程菌的构建，使具有抑菌功效的植物内生菌吡咯伯克霍尔德氏菌JK‑SH007高效表达了Cry3A蛋白。通过生测实验，工程菌B.pyrrocinia JK‑SH007(pHKT2‑Cry3Aa)被证明对榆树甲虫幼虫具有较好的控制效果。