[00688821]凝血酶适配体功能化电纺丝增强固相微萃取棒的制备方法及应用

该项目研究克服了现有固相微萃取技术选择性不够的局限性，提供了一种新的适配体功能化电纺丝增强固相微萃取棒的制备方法，所要解决的技术问题是使其采用的适配体功能化固相微萃取涂层制备具有高选择性、高特异性的适配体功能化电纺丝增强固相微萃取棒，其直接以不锈钢丝为底材，用电纺丝技术制备表面积大、稳定性高、耐用性强的固相萃取棒，并采用碳二亚胺法将适配体固定于萃取棒表面，制备适配体功能化电纺丝增强固相微萃取棒，方法简单、使用性强。该发明提出的适配体功能化电纺丝增强固相微萃取棒的制备方法，包括以下步骤：采用自由基水相沉淀聚合方法合成聚丙烯腈-马来酸高聚物；采用电纺丝技术将聚丙烯腈-马来酸聚合物固定在不锈钢丝表明制成固相微萃取棒；通过碳二亚胺方法将凝血酶适配体固定在固相微萃取棒涂层上；制得的适配体功能化聚丙烯腈-马来酸高聚物基固相微萃取棒可直接用于人血清、人血浆等复杂样品中痕量凝血酶的分离分析。研究结果表明该发明采用聚丙烯腈-马来酸聚合物为固相微萃取基体，以不锈钢丝为底材，采用电纺丝技术制备并控制固相微萃取基体涂层的厚度，涂层均匀，疏松多孔，表面积大；经过凝血酶适配体修饰电纺丝增强的聚丙烯腈-马来酸聚合物涂层，获得了特异性强、稳定性高的适配体修饰电纺丝增强固相微萃取棒；对凝血酶具有高的选择性萃取能力，可应用于复杂样品中痕量凝血酶的选择性分离、富集和分析；采用高效液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS）方法进行定性定量分析，实现了痕量物质的高灵敏性、超微量分析准确分析。