[00785772]壮骨方对DOP大鼠骨质代谢及成骨细胞Ras-Raf-MAPK信号通路调控机制的研究

课题来源与背景：随着人们生活水平的提高，人口老龄化，糖尿病的发生率也逐年增高，糖尿病性骨质疏松症(DOP)患病率也逐年增长，其患病率的报道差别较大，从30%～60%不等。该病早期症状隐匿，临床不被重视，一旦出现骨折，由于患者的特殊机体状态，使伤残率和死亡率显著升高，给患者的生命健康造成极大威胁，也给患者家属和社会带来沉重的负担。其高致残致死率引起了医患双方的共同重视。因此，如何有效地防治DOP，是糖尿病和骨科医师必须面对且亟待解决的课题。研究目的与意义：为更好地防治DOP，中医讲“未病先防，早治防变”，对待DOP的防治，应该在发生骨质代谢障碍之前，及早从多方面、多角度入手进行干预，防止疾病进一步演变。所以，该课题依托中医药优势，结合现代分子学、细胞学等理论，通过验证壮骨方在防治2型糖尿病骨质疏松进程中的作用，同时探讨壮骨方对糖尿病大鼠IGF-1、TNF-α、RAGE、瘦素（LEP）、胃促生长素（Ghrelin）水平的影响，观察壮骨方对糖尿病大鼠成骨细胞超微结构的影响，通过细胞学实验探讨壮骨方对成骨细胞P38MAPK信号通路的影响，以期提前截断，尽早扭转病理状态。主要论点与论据：论点：壮骨方可延缓2型糖尿病骨质疏松进程，作用机制可能与降低血清及骨组织内TNF-α，升高IGF-1、LEP、Ghrelin水平有关，同时其可能有保护成骨细胞活性的作用，通过提高Ras-Raf-MAPK细胞通路活性起作用；论据：壮骨方可提高糖尿病大鼠骨密度，防止骨参数下降；壮骨方组大鼠与糖尿病组大鼠比较，可见成骨细胞活性加强，胞浆内细胞器较多，粗面内质网丰富，线粒体发达；壮骨方可提高血清IGF-1，降低TNF-α水平，可升高LEP、Ghrelin水平；壮骨方可降低大鼠骨组织中TNF-α、RAGE mRNA及蛋白表达水平，升高骨组织中IGF-1、LEP、Ghrelin mRNA及蛋白表达水平；壮骨方有效成分可提高高糖培养的MG-63细胞活性，可提高SB203580（P38MAPK信号通路的特异性抑制剂）培养的MG-63细胞活性；中药壮骨方有效成分可提高高糖培养的MG-63细胞Ras、B-Raf、P38MAPK、ERK的mRNA表达水平。创见与创新：该研究在前期研究的基础上，本着“未病先防”原则，围绕与骨代谢障碍密切相关的AGEs、TNF-α、IGF-Ⅰ、瘦素、Ghrelin等一系列因素，探讨壮骨方对骨质代谢障碍的多靶点调节作用；该课题以壮骨方提取物为主要研究对象，以成骨细胞为研究重点，运用MG63细胞高糖模型，以Grb2、MAPK、ERK等胞内信号为指标，开展壮骨方对成骨细胞Ras-Raf-MAPK/ERK下游信号转导通路调控作用机制的研究，进一步探讨壮骨方的作用机制。社会经济效益，存在的问题：首先，壮骨方对糖尿病性骨质疏松有确切的防治作用，可以作为防治糖尿病性骨质疏松症的新选择。另外，该课题有利于进一步扩展论证中医药在糖尿病性骨质疏松防治中发挥的作用，丰富中医药现代化理论，同时，课题提高了科研者对科学研究的进一步认识掌握，培养了研究生的科研意识及科研能力。存在的问题：需更多的开展循证医学研究，进一步验证壮骨方的作用。历年获奖情况：无。