[00943288]中药活性多糖对病毒诱发免疫细胞氧化应激的干预作用及其分子机制

项目来源与背景：项目来源为国家自然科学基金项目（项目编号：30860209）。近年来流行的猪圆环病毒感染、鸡传染性法氏囊炎等疾病的病理过程中，病毒感染后常导致机体的免疫抑制，使疫苗的免疫效力降低。病毒感染的机体常处于慢性氧化应激状态；氧化应激不利于细胞抗病毒状态建立而促进病毒复制，炎性细胞介质如肿瘤坏死因子的聚集进一步加重氧化应激，导致氧化损伤。已经发现许多具有免疫活性的多糖还具有抗氧化的作用，中药活性多糖对病毒诱导的免疫细胞氧化应激的干预作用与中兽医“治未病”的理论体系相吻合，可为中兽医药防治动物疫病提供科学依据。采用山豆根多糖、马尾藻多糖调节免疫细胞内自由基水平和氧化还原状态，达到干预氧化应激、恢复细胞免疫功能目的；以期探明一些重要传染病免疫保护和治疗欠佳的原因，可为畜禽病毒性疾病的预防和治疗提供新的思路。技术原理及性能指标：分离提取山豆根多糖、马尾藻多糖，获得了最佳提取工艺，分析了两种多糖的一级结构。山豆根多糖、马尾藻多糖体外具有清除活性氧，能升高细胞内还原型谷胱甘肽水平，降低一氧化氮水平，调节小鼠、鸡脾脏淋巴细胞内氧化还原状态，降低病毒感染小鼠、鸡、猪免疫细胞引起的氧化胁迫，抑制促凋亡基因表达，能提高细胞内抗氧化能力，影响免疫细胞信号转导而干预免疫细胞的氧化应激。研究发现，山豆根多糖、马尾藻多糖对病毒感染诱发的免疫细胞氧化应激具有干预作用。该项目发表论文11篇，其中在国外SCI收录期刊发表论文2篇；申请获得国家发明专利1项（已经授权）。技术的创造性与先进性：病毒感染诱发免疫细胞氧化应激模型的建立建立了鸡法氏囊淋巴细胞体外氧化应激模型；建立了病毒诱发的猪脾脏淋巴细胞氧化应激模型；建立了病毒诱发的小鼠RAW264.7细胞氧化应激模型。进行了山豆根多糖、马尾藻多糖分离提取方法优化，获得了最佳提取工艺条件，并对山豆根多糖、马尾藻多糖中单糖组成进行了分析。技术的成熟程度，适用范围和安全性：该成果属基础理论研究，处于实验研究阶段。应用情况及存在的问题：伴随着该区畜禽养殖业的快速发展，各种动物疫病流行的趋势也在逐年升高，随之而来的是抗生素在临床上的广泛使用、滥用，给食品公共卫生安全造成了极大的隐患。该项目针对动物疫病形势，采用猪圆环病毒-Ⅱ型、鸡传染性法氏囊炎病毒等免疫抑制性病毒体外感染免疫细胞，建立免疫抑制模型，采用山豆根多糖、马尾藻多糖调节免疫细胞内自由基水平和氧化还原状态，达到干预氧化应激、恢复细胞免疫功能目的，可为畜禽病毒性疾病的预防和治疗提供新的思路，并为研制新型高效免疫佐剂和免疫增强剂，提高动物机体的免疫力提供科学依据，也为绿色健康养殖提供了新的参考。